1. Введение

Основной путь к пониманию влияния климатических переменных на производительность растений – это интерпретация информации, которая хранится в естественных архивах прошлого. Деревья, как долгоживущие организмы, непрерывно фиксируют экологически значимую информацию в структуре годичных колец и, следовательно, представляют собой природные архивы для изучения глобальных изменений в широком временном и пространственном масштабах [1]. В рамках данного бэкграунда Локосселли и Бакеридж [2] вводят в обращение новый термин «дендробиохимия». Термин расширяет понимание взаимосвязи между условиями произрастания дерева и процессами, происходящими в годичном кольце, объединяя «особенности» этих процессов в единую картину. «Особенности» внутри годичных колец должны включать параметры, которые отражают физиологию и биохимию и которые можно измерить аналитически. Наше исследование направлено на поиск ответа на вопрос о внутреннем и внешнем контроле ксилогенеза в изменяющейся среде. Исследование такого рода имеют высокую теоретическую значимость в развитии концепции образования (синтеза) и строения древесинного вещества как природной полимерной композиции. Перспективным подходом в данном случае является использование современного и экспрессного метода исследования такого как инфракрасная Фурье-спектроскопия (ИКФС). ИКФС является одним из распространенных методов определения молекулярных структур, идентификации соединений в биологических образцах, а также исследования сложных полимеров [3]. ИКФС хорошо зарекомендовала себя при анализе основных компонентов древесины, поскольку это быстрый и часто используемый метод определения химического состава сложных образцов. При помощи метода могут быть проанализированы изменения в кристаллической структуре целлюлозы, особенности строения лигнина [4]. Реализованный в нашем исследовании подход с использованием ИКФС позволяет, по-нашему мнению, выйти на новые аспекты в оценке влияния погодных условий на химический состав формирующейся древесины ствола деревьев и прогнозе качества древесины, произрастающей в условиях современного климатического тренда.

Целью нашего исследования является получение информации о биохимической структуре в годичных приростах, сформировавшихся в разных погодных условиях на примере березы извилистой (Betula Tortuosa Ledeb.), произрастающей в экотоне альпийской лесотундры Кузнецкого Алатау.

2. Методы и принципы исследования

Исследования выполнялись в экотоне горной лесотундры Кузнецкого Алатау. Экотон горной лесотундры является зоной, где воздействие климата на рост древесной растительности является наиболее значимым вследствие лимита роста по температуре. Выбор объекта исследования обусловлен тем, что погодные условия вегетационного периода на территории Кузнецкого Алатау по-разному влияют на соотношение основных полимерных компонентов в клеточных стенках ранних и поздних трахеид у Betula tortuosa Ledeb. [5]. Для исследования физико-химической неоднородности древесины годичных колец было отобрано 5 здоровых деревьев Betula tortuosa L. со следующими характеристиками: деревья здоровые, 1–2 категории жизненного состояния; листва зеленого цвета; средний возраст 60 лет; средний диаметр 15 см; средняя высота 4,6 м. Датировка годичных слоев на взятых с деревьев спилах проводилась на измерительном комплексе LINTAB v6.0. Годичные кольца разделяли под микроскопом при десятикратном увеличении. Приготовленные экспериментальные образцы годичных колец с 1980 по 2015 гг. кондиционировали до равновесного водосодержания, при относительной влажности окружающей среды около 65% и температуре 20±2°С. Связь исследуемых физико-химических показателей годичных слоев у березы извилистой и климатических переменных оценивалась по величине коэффициента корреляции Спирмана. Динамику изменения показателей среднемесячных значений температуры воздуха и количества среднемесячных осадков и физико-химических показателей выявляли с помощью 5-летней скользящей средней для устранения влияния информационного шума [6]. ИК-спектры были получены с помощью инфракрасного Фурье-спектрометра «VERTEX 80V» (Bruker Optics, Германия) в спектральном диапазоне 8000 – 350 см-1. Спектральное разрешение 0,2 см-1; воспроизводимость волнового числа ±0,05 см-1. Для снятия спектров использовали тонкие таблетки бромида калия с запрессованными в них образцами древесины. Взвешивание образцов проводили на лабораторных весах XFR-125E. 1-2 мг древесины растирали в ступке с 100 мг KBr, измельченный материал помещали в пресс-форму, эвакуировали воздух, и прессовали. Анализ спектров осуществляли в программной среде «OPUS». Результаты исследования 35 годичных колец деревьев (1980-2015 гг.) методом ИКФС были представлены в виде ИК-спектров.

3. Основные результаты

Для выявления периодов в сезоне со значимым влиянием климатических факторов на радиальный прирост применяли расчет и анализ статистических связей спектральных показателей древесинного вещества Betula tortuosa L. с климатическими переменными – среднемесячной температурой воздуха и количеством месячных осадков в период 1989–2015 гг. Рассчитанные коэффициенты корреляции Спирмана представлены на рисунках 1 и 2. Связь спектральных показателей со среднемесячной температурой представлена на рисунке 1. Интенсивности полос при 1375 см-1 (С–Н связей в целлюлозе) и при 1325 см-1 (лигнин S типа) показывают высокий значимый уровень отрицательной корреляции (p<0,001) с температурой в мае (-0,59 и 0,66, соответственно). Кроме того, выявлены значимые при p<0,001 отрицательные корреляции интенсивностей полосы при 1325 см-1 (лигнин S типа) с августовскими значениями температуры воздуха (-0,57) и полосы при 1268 см-1 (метоксильная группа лигнина) (0,64). Значения температуры воздуха в сентябре отрицательно связаны с интенсивностями полос при 1738 см-1 (С=О связи в гемицеллюлозах) и при 1506 см-1 (С=С связи в лигнине) (-0,61 и -0,73, соответственно). Значимые при р<0,001 коэффициенты корреляции между уровнем среднемесячных осадков и спектральными показателями основных полимерных компонентов древесинного вещества у березы извилистой представлены на рисунке 6. Так, интенсивность полос при 1375 см-1 (С–Н связей в целлюлозе) и при 1325 см-1 (лигнин S-типа) отрицательно связаны с осадками в июне (-0,61 и -0,64, соответственно). Кроме того, выявлена положительная связь интенсивности полосы при 1325 см-1 (лигнин S-типа) и июльскими осадками (0,60).

4. Обсуждение

Экотон горной лесотундры является классическим полигоном для оценки влияния температуры на прирост древесных видов [7]. Наибольшее влияние на спектральные показатели лигноуглеводной матрицы оказала температура мая и сентября. В мае на территории экотона значения температуры воздуха становятся положительными и в растительной клетке активируются процессы, связанные с изменениями в составе полисахаридов, в активности ферментов, модифицирующих клеточную стенку, которые приводят к ослаблению межмолекулярных связей в лигноуглеводной матрице. В конце сезона вегетации (август-сентябрь) изменяется структура лигнина и этот процесс происходит во время незначительного понижения температуры в августе и достигает своего пика в сентябре, что влияет на синтез лигнина и как следствие на саму клеточную стенку путем ее укрепления, тем самым предотвращая повреждение от замерзания и коллапса клеток растения [8]. Упрочнение межмолекулярных связей в лигнине в этот период может быть связан с накоплением фенольных соединений. Высокое содержание фенольных соединений отмечается в осенний период, что соответствовало периоду вхождения растений в покой [9].

На территории экотона Кузнецкого Алатау осадки угнетают прирост древесной растительности. Отрицательные корреляции спектральных характеристик лигнина и целлюлозы выявлены с июньскими осадками. Положительная корреляция спектральных характеристик лигнина с осадками найдена в июле. Так, выявлено, что при понижении количества осадков в мае межмолекулярные взаимодействия в целлюлозе усиливаются. Реакция инфракрасных спектров целлюлозы на дефицит влаги еще до конца не изучена, тем не менее, в ряде исследований сообщается, что биосинтез целлюлозы может изменяться в ответ на дефицит воды, о чем свидетельствует снижение содержания целлюлозы у нескольких различных видов растений [10]. Ориентация микрофибрилл целлюлозы и состав клеточной стенки являются важными факторами, которые определяют направление роста клеток, подразумевая, что целлюлоза может прямо или косвенно регулироваться доступностью воды [11]. Кроме того, в ряде исследований выявлено, что в ответ на водный стресс значение модуля упругости клеточных стенок, некоторых растений увеличивался и это указывает на тот факт, что жесткие стенки клеток могут быть необходимы для поддержания целостности клеток и тканей во время регидратации после периода стресса [12], [13]. В мае также выявлено влияние осадков на силу межмолекулярных взаимодействий в лигнине.

Лигнификация – это сложный процесс, который протекает при участии множества фенольных субстратов и ферментов [14]. Выявлено, что лигнификация может быть преждевременной: подобное явление происходит, когда активизируются процессы, которые связаны с подготовкой растительной клетки к холоду, чтобы избежать повреждения клеточной стенки в тот момент, когда растение подвергается водному стрессу [9], [16] что, по нашему мнению, могло способствовать упрочению связей в лигнине в июне. При некотором повышении количества осадков в июле интенсивность межмолекулярных связей в лигнине тоже увеличивается. В настоящее время доступно очень мало данных об активности ферментов и сигнальных процессах, которые регулируют ответ синтеза ароматической компоненты на повышение уровня влаги в процессах лигнификации.

5. Заключение

В настоящем исследовании с применением метода ИКФС получен новый фактический материал, характеризующий спектральные особенности годичных голец березы извилистой. Выявлено, что погодные условия сезона роста существенно влияют на силу межмолекулярных взаимодействий в лигноуглеводной матрице каждого годичного кольца:

1) в апрель-майский период предсезонной реактивации камбия и начала сезона роста при незначительном повышении температуры воздуха отмечено усиление межмолекулярных взаимодействий в лигноуглеводной матрице;

2) в конце сезона вегетации межмолекулярные взаимодействия в лигноуглеводной матрице ослабевают с понижением температуры;

3) обильные осадки определяют силу взаимодействий между основными полимерными компонентами в клеточной стенке древесинного вещества у березы извилистой;

4) ароматическая компонента годичных колец оказалась более чувствительной к изменяющимся климатическим факторам, чем углеводная;

5) основным фактором, лимитирующим формирование «уникальной» полимерной композиции клеточной стенки березы извилистой, произрастающей в экотоне горной лесотундры Кузнецкого Алатау, является дефицит тепла.

Исследование показало, что метод ИКФС эффективен для детализации характеристик годичных колец у Betula tortuosa L., полученных на основе их физико-химических параметров в зависимости от климатических условий вегетационного периода. Применение этого метода позволит, по-нашему мнению, количественно прогнозировать последствия современного климатического тренда.

The additional file for this article can be found as follows: