ПЕРЕГОНКА С ВОДЯНЫМ ПАРОМ – ДОСТУПНЫЙ МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ПРИРОДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ИЗ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

Эффективность многих биологически активных соединений в большинстве случаев зависит от их стереохимической чистоты, поэтому большое значение имеют правильный выбор исходного сырья и пути его трансформаций в целевую молекулу. Для построения оптически активных соединений в большинстве случаев используются два подхода: стереоконтролирумый синтез и использование готовых хиральных синтонов. Первый из них не всегда позволяет получать достаточную изомерную чистоту, что в случае синтеза биологически активных соединений часто имеет определяющее значение. Второй подход лишен этого недостатка, если асимметрический центр не затрагивается при дальнейших трансформациях. Однако высокая цена большинства оптически чистых соединений, предлагаемых для превращений, ограничивает применение и этого подхода. Функционализация природных соединений с сохранением имеющихся асимметрических центров имеет много примеров использования монотерпеноидов в органическом синтезе, например, L-(-)-ментола, R-4-пулегона, карвона, цитронеллола, лимонена, пинена и т.д.

Поиск доступного природного сырья с высоким содержанием целевых соединений, а также путей их выделения и очистки с обоснованной экономической эффективностью представляют собой актуальную проблему. Для получения эффективных биологически активных соединений для медицины, фармакологии, пищевой промышленности, сельского хозяйства и других отраслей деятельности человека требуются новые пути их синтеза, и желательно, экономически как можно более эффективных

Изучение литературы показывает много примеров использования, например, (R)-пулегона (с оптической чистотой 100%), в органическом синтезе, в том числе для получения биологически активных соединений. Однако данный монотерпеновый ненасыщенный кетон широкого внедрения в практику не нашел, что, по-видимому, связано с малой его доступностью (стоимость 10 мл ~ 40 евро). В то же время, относительно доступный (100 г ~ 20 евро) оптически чистый монотерпеноид L-(-)-ментол, выделяемый из эфирного масла перечной мяты, не получил широкого применения в получении биологически активных веществ

В нашем исследовании проведено выделение ментола из эфирного масла перечной мяты (Mentha piperita), выращенной в Бирском районе Республики Башкортостан, с целью выявления возможности ее выращивания в агробиостанции Бирского филиала УУНиТ и извлечения мятного масла и ментола. Полученный оптически чистый ментол возможно использовать для синтеза ряда биологически активных соединений, в том числе и низкомолекулярных биологических регуляторов насекомых.

Выделение мятного масла из вегетативной массы перечной мяты произведено с использованием установки для перегонки с водяным паром при атмосферном давлении, согласно известной методики

Все органические растворители и реактивы, использованные в эксперименте, соответствуют требованиям, предъявляемым при выделении и синтезе природных биологически активных соединений.

Экспериментальная часть работы выполнена в лаборатории Бирского филиала Уфимского университета науки и технологий.

Для устранения погрешностей эксперимента все опыты проводились параллельным методом с выборкой равной 3. Расчет доверительного интервала выполнен с применением критерия Стьюдента ta = 0.95.

3.1. Выделение мятного масла

Листья мяты загружают установку для перегонки с водяным паром, и проводят отгонку эфирного мятного масла. Процесс перегонки проводят до тех пор, пока объем эфирного масла в колбе-приемнике не перестанет увеличиваться. Масло отделяют от водного слоя и взвешивают.

3.2. Выделение ментола из мятного масла

Мятное масло растворяют в 50 мл этилового спирта, добавляют 2 г гидроксида калия и кипятят смесь в течение 30 мин. Затем отгоняют спирт, к остатку добавляют 50 мл смесь спирта и эфира в равных пропорциях. Полученную смесь переносят в делительную воронку, промывают водой до нейтральной реакции среды, отделяют эфирный слой и сушат осушителем с нейтральной средой, например, сульфатом натрия. Отделяют масло на роторном испарителе.

К полученному маслу добавляют борную кислоту из расчета 1 г на 10 г масла и отгоняют при пониженном давлении отдельные фракции: при разрежении 10-15 мм рт.ст. и температуре около 100 °С отгоняется этерификационная вода, при 3 мм рт.ст. и 200 °С отгоняются спутники ментола, в итоге в перегонной колбе остается нелетучий ментиловый эфир борной кислоты.

Для получения чистого ментола, перегонный остаток переносят с использованием спирта в круглодонную колбу, добавляют 2 мл насыщенного раствора соды и перегоняют с водяным паром. Ментол, перешедший в дистиллят, отделяют в делительной воронке. Очистка ментола проводится перекристаллизацией из петролейного эфира.

Согласно литературным данным, выход составляет 50-70% от эфирного масла.

3.3. Результаты эксперимента

В результате исследования вегетативной массы (преимущественно состоящей из листьев) мяты перечной, выращенной в Бирском районе Республики Башкортостан, получены следующие данные, приведенные в таблице 1.

По результатам извлечения мятного масла из мяты перечной можно отметить, что выход продукта меньше указанного в литературе. Однако содержание эфирного масла в 46-47 % также является приемлемым и позволяет использовать данные образцы, выращенные в Бирском районе Республики Башкортостан для извлечения как самого масла, так и содержащихся в нем индивидуальных веществ, в частности, L-(-)-ментола. Выход ментола из эфирного масла 1,9 % также соответствует литературным данным.

Свойства полученного ментола изучены с помощью физико-химических методов анализа. ИК спектры записывали на приборе UR-20 в тонком слое. Оптическое вращение измерено на поляриметре «Perkin-Elmer-241-MC». Температура плавления кристаллического ментола измерена на приборе Mettler Toledo Melting Point MP 30.

L-(-)-ментол, выделенный нами из эфирного масла перечной мяты имеет следующие характеристики:

1. ИК-спектр (n, см-1): 1030 (C-O), 3200-3500 (О-Н).

2. Температура плавления 42-43°С.

3. Угол оптического вращения [α]D20– 49.0° (с 20, этиловый спирт).

Таким образом, по проведенным нами исследованиям можно сделать следующие выводы.

Перегонка с водяным паром является доступным и недорогим способом извлечения природных соединений из растительного сырья, в частности, ментола из вегетативной массы мяты перечной. Данный метод может быть широко использован в лабораториях любых уровней, так как используемое оборудование относительно дешевое и не требует высокой квалификации персонала и особых условий проведения опытов.

Содержание (выход) мятного масла в мяте перечной, выращенной в Бирском районе Республики Башкортостан, соответствует известным литературным данным. Однако выход ментола из извлеченного мятного масла ниже минимального выхода, указанного в литературе, что, вероятно, объясняется климатическими условиями и особенностями почвы Бирского района. Учитывая себестоимость растительного сырья и недорого метода выделения, возможно использование указанных образцов мяты перечной для извлечения ментола.

Свойства и характеристики выделенного ментола соответствуют литературным данным, что позволяет использовать его для синтеза биологически активных веществ, содержащих оптически активные центры высокой чистоты.